核对医嘱、检验申请单、标签／条形码及标本容器，无误后贴标签／条形码于标本容器外壁上。评估患儿病情、治疗情况、意识状态、肢体活动能力，穿刺部位的皮肤状况、静脉充盈度及管壁弹性；对血液标本采集的认知程度及合作程度；有无生理因素影响（饮食、饮茶或咖啡、运动、情绪波动等）；需做的检查项目、采血量及是否需要特殊准备；病室温湿度适宜、安静、清洁、光线适中，必要时屏风或围帘遮挡（口述）
物品准备齐全，在有效期内：病历、检验申请单、标签或条形码、有效碘浓度不低于0.5%的碘伏（或洛本清消毒酊剂）、棉签、止血带、胶布、治疗巾、弯盘、洗手液、静脉留置针（18~24G）、输液接头、无菌透明贴膜、采血针、头皮针、预充式导管冲洗器、0.9%生理盐水、注射器、标本容器、污染止血带存放篮
携用物至患儿床旁，依据检验申请单核对患儿床号、姓名、性别、年龄及腕带；核对检验申请单、标本容器以及标签／条形码是否一致，解释标本采集目的及配合方法
选择粗直、弹性好的合适静脉，将治疗巾置于穿刺部位下，在穿刺点上方（近心端）8-10cm处扎止血带，评估选择穿刺血管，松止血带
消毒穿刺部位皮肤，消毒范围直径≥8cm(1次），待干，备无菌透明膜，扎止血带，再次消毒，待干
取下针帽，旋转松动外套管，穿刺（使针头与皮肤呈 15-30°角进针），见回血后放低5-10°角，再进针2-5mm,后撤针芯2-3mm，将导管全部送入静脉内
以穿刺点为中心，透明敷料中心对准穿刺点，无张力放下透明敷料，导管塑型固定，抚平贴膜（同临床常规静脉留置针输液技术）
将一次性采血针刺入肝素帽进入导管内，连接负压真空采血管
采血管顺序正确、标本即刻混匀，采血量符合要求。（血培养瓶→无添加试管→凝血管→枸橼酸钠管→肝素管→EDTA 管→草酸盐→氟化钠管）
血培养瓶：瓶盖用75%的酒精消毒培养瓶橡皮塞，至少停留2分钟，待消毒剂完全干燥，以上步骤重复3次（厌氧瓶→需氧瓶）
全血标本：轻轻摇动上下颠倒5-10次，使血液与抗凝剂充分混匀
用预充式导管冲洗器3-5ml连接头皮针，刺入肝素帽采用脉冲正压360°旋转式封管方法，直至肝素帽及导管内无血液滞留，卡扣夹在靠近针座的近三分之一处
生理盐水予输液接头排气，连接于留置针/生长激素激发试验等需多次采血时，常规消毒肝素帽，一次性采血针刺入肝素帽进入导管内，连接负压真空采血管进行弃血，弃血量至少1ml，然后再连接相应的采血管，冲封管技术同前
再次核对检验申请单、床号、姓名、性别、年龄、腕带及标本
观察血标本是否合格，将标本连同化验单及时送检（口述）