PCR流程SOP考试-调查问卷模板-问卷网

姓名

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工号

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一、选择题（共10题，单选每题3分，共30分）

1、收到刷圈拭子样品，首先分流到哪个科室

A、细菌科室

B、收样科室

C、PCR科室

D、抗体科室

2、关于血清样品说法不正确的是

A、检测抗体送检单上必须写上免疫情况

B、血清样品如需检测抗原，可先进行抽提，然后分流到抗体科室

C、血清到达实验室可检测前再进行收取，不用当天收取

D、提前采集口鼻拭子排查 A，阴性方可采血

3、样品做哪些项目需要灭活？

A、细菌检测

B、寄生虫检测

C、抗原检测

D、抗体检测

4、组织病料样品送检要求？

A、-20℃冷冻送检

B、常温送检

C、4℃冷藏送检

D、-10°冷冻送检

5、酒精灯内，添加95%酒精，添加时不得超过酒精灯容量多少？

A、1/3

B、2/3

C、1/2

D、1/5

6.PCR检测的加样顺序是？

A.待测样品-阴性对照-阳性对照

B.阴性对照-待测样品-阳性对照

C.阴性对照-阳性对照-待测样品

D.阳性对照-阴性对照-待测样品

7.细菌核酸提取使用哪种核酸提取方法

A.纳米磁珠法

B.酚/氯仿抽提法

C.煮沸裂解法

D.醇沉淀法

8.对于异常指标说法正确的是

A.流产指标:5000头母猪的繁殖场一天流产4窝以上为异常

B.死亡指标:一个单元一天死亡2头以上或者一天死亡一头但是连续死亡为异常，非正常死亡立即预警

C.异常指标:一个单元超过3%有相同症状的猪只为异常，不包含出生弱仔死亡

D.异常指标:一个批次超过3%有相同症状的猪只为异常，不包含出生弱仔死亡

9.样品分类处理说法错误的是

A.场区采血前一定提前排查 H 为阴性方可采集，血液按顺序放入离心机中进行离心（2000r/min、2 min）

B.将抗凝血管（精液管、脐带血管、阉割液管）反复颠倒混匀后，收集 1.5 ml 于 5 ml 离心管中

C.拭子收取时加入 1 ml 生理盐水，同单元同圈猪鼻拭子放入同一个离心管中

每次收样前后用 75%酒精对桌面进行消毒

D.取饲料或其他辅料200g于自封袋中，加入300mL无菌纯水

10.混样时应注意事项说法错误的是

A.混样完成后，放在涡旋震荡仪上震荡1 min，2000 r/min 低速离心2 min

B.混样原则是：5混1，疾病决策混样时，可跨单元、跨类群混样

C.根据送检的内容、检测的项目进行决策混样（活猪或环境 5 混 1，死猪最多 8 混 1）

D.等体积混样，过程中混过的样品和未混的样品分开放，混好一个样品盖上盖子，标记号

二、判断题（共10题，每题2分，共20分）

1、细菌样品可以高温灭活；

对

错

2、采样后剩余病料需进行高压灭菌，无害化回收处理；

对

错

3、收样时按加急样―死亡猪病料―异常猪病料―生物安全样品―正常猪样品顺序进行收样

是

否

4、同单元同圈猪鼻拭子分开收取

对

错

5、抽提设置专门的试剂配制区，单独一个房间或者净区内超净工作台内

对

错

6、引物稀释前放入离心机12000 r/min，4 ℃，离心5 min

对

错

7、定量时每种疾病都要设置1个阳性对照和1个阴性对照

对

错

8、定量布板命名格式为日期-姓名-仪器-对应检测项目-板数

对

错

9、定量操作在超净工作台操作时，放下玻璃窗，只允许放进手臂。

对

错

10、抽提区应处于实验室最洁净区域，定量区域属于脏区，应处于下风口

对

错

三、多选题（共10题，每空5分，共50分）

1、下列说法正确的有

A.灭菌的离心管与八连管摆放时用镊子夹取其外壁，不可徒手去取；不可在操作过程中手臂经过EP管上方。

B.移液枪使用过程中调整好刻度，慢吸慢打，保证吸取体系或样品量准确，必须做到稳、准，在此前提下再提高速度，保证工作效率。

C.加样过程中样品需要进行排版，必须保证加样的顺序与排版顺序100%一致。

D.体系用完及时保存，当天需要防置冷藏，长时间保存应放置于-20℃保存，都必须保证避光。

E.将需要进行反转录的核酸挑出，用200 μLC常规离心管添加体系及模板，瞬离5 s

2.下列说法错误的有：

A.为防止降解保证稳定性，引物必须在-10℃进行保存

B.样品扩增产物有条带，与阳性对照条带大小一致，为阳性

C.拆检要求所有检测结果确定到单元（流调除外）

D.病毒性同一类群每月分型（持续直至确认）一次，当月再检出不再重复鉴定

E.产房PED检出立即分型

F.波氏检出阳性后需常规分型

3.粪便收集处理说法正确的有

A.用5mL离心管收集2g粪便，加入2mL生理盐水，盖紧离心管盖子，进行编号；

B.浸泡30min，涡旋仪震荡2min，低速离心(2000r/min，离心2min)后取上清提取核酸。

C.粪便送检量不宜过大（不超过10g）；

D.用大小合适的自封袋盛装；

E.采集原始粪便送检，不能进行处理后送检。

4.纱布收集正确的

A.在收取棉绳或纱布类样品过程中，若无样液或液体不足，需再次添加生理盐水或纯净水，使最终样品收集量满足检测需求（1-2mL）；

B.反复揉搓，保证纱布上的病原充分混到水中；

C.打开自封袋将样液收集至5mL离心管中，过程中禁止任何物品接触自封袋内壁，收集完成盖紧离心管盖子，进行编号；

D.涡旋仪震荡2min，低速离心(2000r/min，离心2min)后取上清提取核酸

5.PCR污染解决方法分类

A气溶胶污染如何解决：使用84原液擦桌子地面仪器及喷雾空气（注意个人防护，佩戴口罩手套护目镜）半小时后通风。

B.预混液试剂污染：从新在净区配引物及体系。

C.移液器枪污染：枪头从新高压灭菌烘干后使用。使用84擦拭移液器半小时后再用清水擦拭干净。

D.操作台面污染：使用84擦拭桌面半小时后用清水清洗。

E.核酸提取仪污染：使用84里外擦拭半小时后用清水擦拭

F.定量仪污染：仪器的表面应定期用无菌纱布加少量清水擦洗，清洗后将仪器擦干。若有试剂泄漏在仪器表面或出现污染，应用软布加70%酒精擦拭干净。

6.体质配制时需注意事项包括

A.操作过程中，严禁用手触碰离心管的内盖和内壁。

B.在超净工作台内进行体系配制或样品添加过程中，严禁开启通风。

C.操作过程中，移液器使用慢吸慢打，保证每一次枪头内吸取的试剂够量，打出的试剂完全；每次打出试剂时保证枪头在离心管内部，以防试剂打出时产生气泡破裂飞溅到其他管内。此操作同样适用于抽提加样以及PCR加样。

D.所有冷冻试剂、体系，解冻后，用涡旋仪混匀1分钟，瞬时离心；禁止用移液枪来回吹打，污染试剂。使用新引物，新体系都需要用同一份阳性对照做质控，保证配制无误。

7.下列说法不正确的有

A.所有疾病检出均可直接反馈至生产

B..所有病原的检出均需要进行测序。

C.引物的稀释可以利用超纯水

D.为节约检测成本，混样时相同症状猪只样品均可混到一起

E.实验室的只要分区明确就可以，无需注意科室位置和布局

F.使用移液器时，为保证加样量准确需使用二挡。

G.为保障消毒效果，可使用酒精喷洒后再利用卫可进行消毒

8.实验室的卫生消毒工作正确的有

A.实验室消毒要全面，可以用 10%的 84 消毒液与 1：200 的戊二醛交替使用进行环境消毒，要求早晚各一次。

B.移液枪，仪器，操作台使用前后可以选择 75%的酒精进行常规消毒工作；

C.离心管架、96 孔板 1 星期 1 次浸泡消毒（若当日有阳性样品检出，必须当日马上浸泡消毒），并用清水再次洗干净消毒液残留；

D.白大褂，帽子每周进行统一的清洗工作（84 浸泡消毒）。

9.下列说法正确的有

A.不能及时收集的样品，放到 4℃冷藏冰箱，现收现取；

B.需要做细菌检测样品切记不能冷冻；

C.每次收样前后用 75%酒精对桌面进行消毒；

D.注意手套消毒，保证样品无交叉污染；

10.说法正确的有

A.收集饲料、纱布样品时，保持瓶口高于自封袋口 2-3cm 处加纯水，严禁交叉；

B.注意个人防护措施（口罩、帽子、白服、手套等）穿戴齐全，白服专屋专用，避免交叉，白服每周至少洗两次；

C.试管架每周卫可（1：500）浸泡 10min 以上，清水冲洗；

D.使用过的研钵需1:500卫可或者1:200戊二醛浸泡消毒后清洗，再使用高压锅高压，最后进行高温烘干；

E. DEPC水拿进超净工作台之前用挤干酒精棉擦拭外表面。一经打开，必须用灭菌后的无RNA酶的离心管进行分装

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