A. 二元模型: 在已知存在/不存在靶标信号的模型系统中测量抗体信号。包括野生型与基因敲除,靶向诱导或沉默。
B. 表达范围: 在靶标表达水平有一定连续性的细胞系或组织中检测抗体信号强度。包括 siRNA 和杂合敲除试验。
C. 正交数据: 在使用不依赖抗体的测定法测定的模型系统中,抗体信号与靶标表达相关。包括质谱分析和原位杂交。
D. 多种抗体: 将抗体信号与使用针对靶标非重叠表位的抗体所观察到的信号进行比较。包括免疫沉淀、ChIP 和 ChIP-SEQ。
E. 异源表达: 天然(或突变)靶蛋白异源表达后,在细胞系中评估抗体信号。
F. 补充分析: 抗体特异性可以使用互补测定法来验证。包括竞争性 ELISA、肽斑点印迹、肽封闭或蛋白质阵列。